TY - JOUR

T1 - Epstein-Barr virus-kodet BILF1 er en konstitutivt aktiv G-protein-koblede receptor

AU - Paulsen, Sarah J

AU - Rosenkilde, Mette M

AU - Eugen-Olsen, Jesper

AU - Kledal, Thomas N

N1 - Nøgleord: aminosyresekvens, Dyr, COS celler Cell Line; cellemembranen, GTP-bindende protein alpha subunits, Gi-Go, glykosylering, herpesvirus 4, Human; mennesker Immunhistokemi, Mikroskopi, Confocal; Molecular Sequence Data; Receptorer, G -Protein-Coupled; virusproteiner

PY - 2005

Y1 - 2005

N2 - Både beta-og gammaherpesviruses kode G-protein-koblede receptorer (GPCRs) med unikke farmakologiske fænotyper og vigtige biologiske funktioner. Et eksempel er ORF74, den gamma2-herpesvirus Kaposis sarkom-associated herpesvirus (KSHV)-kodet GPCR, som er meget konstitutivt aktiv og betragtes som den væsentligste Oncogene i Kaposis sarkom patogenese. I modsætning hertil den nuværende annotation af Epstein-Barr virus (EBV) genom ikke afslører nogen GPCR homolog kodet af denne menneskelige onkogene gamma1-herpesvirus. Men, ved at anvende bioinformatik, anerkendte vi, at den tidligere fastsatte EBV åben læsning ramme BILF1 faktisk koder en GPCR. Desuden BILF1 er medlem af en ny familie af beslægtede GPCRs udelukkende kodet af gamma1-herpesviruses. Angivelse af hæmagglutinin-mærkede BILF1 i HEK293 epitelcelle linje viste, at BILF1 udtrykkes som en cirka 50-kDa glykosyleret protein. Immunhistokemi og konfokal mikroskopi afslørede, at BILF1 localizes overvejende til plasma membranen, svarende til lokalisering af KSHV ORF74. Brug kimære G-proteiner, opdagede vi, at menneskelige og rhesus EBV-kodet BILF1 er meget potent konstitutivt aktive receptorer, aktivering Galphai. Desuden BILF1 er i stand til at hæmme forskolin-udløst CREB aktivering via stimulering af endogene G proteiner i en pertussistoksin-følsom måde, at kontrollere, at BILF1 signaler konstitutivt gennem Galphai. Vi foreslår, at EBV kan bruge BILF1 at regulere Galphai-aktiverede veje i løbet af viral lytiske replikation, og påvirker derved sygdomsprogression.

AB - Både beta-og gammaherpesviruses kode G-protein-koblede receptorer (GPCRs) med unikke farmakologiske fænotyper og vigtige biologiske funktioner. Et eksempel er ORF74, den gamma2-herpesvirus Kaposis sarkom-associated herpesvirus (KSHV)-kodet GPCR, som er meget konstitutivt aktiv og betragtes som den væsentligste Oncogene i Kaposis sarkom patogenese. I modsætning hertil den nuværende annotation af Epstein-Barr virus (EBV) genom ikke afslører nogen GPCR homolog kodet af denne menneskelige onkogene gamma1-herpesvirus. Men, ved at anvende bioinformatik, anerkendte vi, at den tidligere fastsatte EBV åben læsning ramme BILF1 faktisk koder en GPCR. Desuden BILF1 er medlem af en ny familie af beslægtede GPCRs udelukkende kodet af gamma1-herpesviruses. Angivelse af hæmagglutinin-mærkede BILF1 i HEK293 epitelcelle linje viste, at BILF1 udtrykkes som en cirka 50-kDa glykosyleret protein. Immunhistokemi og konfokal mikroskopi afslørede, at BILF1 localizes overvejende til plasma membranen, svarende til lokalisering af KSHV ORF74. Brug kimære G-proteiner, opdagede vi, at menneskelige og rhesus EBV-kodet BILF1 er meget potent konstitutivt aktive receptorer, aktivering Galphai. Desuden BILF1 er i stand til at hæmme forskolin-udløst CREB aktivering via stimulering af endogene G proteiner i en pertussistoksin-følsom måde, at kontrollere, at BILF1 signaler konstitutivt gennem Galphai. Vi foreslår, at EBV kan bruge BILF1 at regulere Galphai-aktiverede veje i løbet af viral lytiske replikation, og påvirker derved sygdomsprogression.

U2 - 10.1128/JVI.79.1.536-546.2005

DO - 10.1128/JVI.79.1.536-546.2005

M3 - Journal article

C2 - 15596846

VL - 79

SP - 536

EP - 546

JO - Journal of Virology

JF - Journal of Virology

SN - 0022-538X

IS - 1

ER -